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主营：主营：研究并生产荧光和发光探针，信号转导研究的试剂
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当前位置： 首页 > 产品中心 > Other_kits > AAT Bioquest/Amplite&trade；通用荧光蛋白酶活性测定试剂盒*绿色荧光*/13500/500测试
商品详细AAT Bioquest/Amplite&trade；通用荧光蛋白酶活性测定试剂盒*绿色荧光*/13500/500测试
AAT Bioquest/Amplite&trade；通用荧光蛋白酶活性测定试剂盒*绿色荧光*/13500/500测试
AAT Bioquest/Amplite&trade；通用荧光蛋白酶活性测定试剂盒*绿色荧光*/13500/500测试
商品编号： 13500
品牌： aatbio
市场价： ¥56560.00
美元价： 33936.00
产地： 美国(厂家直采)
公司：
产品分类： 其它检测试剂盒
公司分类： Other_kits
联系Q Q： 3392242852
电话号码： 4000-520-616
电子邮箱： info@ebiomall.com
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商品介绍
Overview
PrinterFriendlyVersion

Ex/Em(nm)494/521
MWN/A
CAS#N/A
SolventDMSO
StorageF/D/L
CategoryEnzymeDetection
PeptidasesandProteases
RelatedMicroplateReaders
BiochemicalAssays
MonitoringofvariousproteaseactivitieshasbecomearoutinetaskformanyBIOLOGicallaboratories.OurAmplite™UniversalFluorimetricProteaseActivityAssayKitsareanidealchoiceforperformingroutineassaysnecessaryduringtheisolationofproteases,orforidentifyingthepresenceofcontaminatingproteasesinproteinsamples.Thekitsusefluorescentcaseinconjugatesthatareproventobeagenericsubstrateforabroadspectrumofproteases.Intheintactsubstrate,caseinisheavilylabeledwithafluorescentdye,resultinginsignificantfluorescencequenching.Protease-catalyzedhydrolysisrelievesitsquenchingeffect,yieldingbrightlyfluorescentdye-labeledshortpeptides.Theincreaseinfluorescenceintensityisdirectlyproportionaltoproteaseactivity.Thekitsprovidealltheessentialcomponentswithanoptimized"mix&read"protocolthatcanbeeasilyautomatedtoHTSinstruments.
SpectrumAdvancedSpectrumViewer

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Wavelength(nm)


Thisprotocolonlyprovidesaguideline,andshouldbemodifiedaccordingtoyourspecificneeds.
ProtocolA:Measureproteaseactivityintestsamples

1.Prepareworkingsolutions:

1.1   Makeproteasesubstratesolution:DiluteProteaseSubstrate(ComponentA)at1:100in2Xassaybuffer(ComponentC).Use50μLofproteasesubstratesolutionperassayina96-wellplate.

Note:The2XAssayBuffer(ComponentC)isdesignedfordetectingtheactivityofchymotrypsin,trypsin,Thermolysin,proteinaseK,proteaseXIV,andhumanleukocyteelastase.Forotherproteases,pleaserefertoAppendixIfortheappropriateassaybufferformula.

1.2   Trypsindilution:DiluteTrypsin(5U/µL,ComponentB)at1:50inde-ionizedwatertogetaconcentrationof0.1U/µL.

2.Addreagentspreparedinstep1intoa96-wellmicroplateaccordingtoTable1andTable2.

 

Table1.Layoutofthesubstratecontrol,positivecontrol,andtestsamplesina96-wellmicroplate

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Note:SC=SubstrateControl,PC=PositiveControl,TS=TestSamples.

 

Table2.Reagentcompositionforeachwell

SubstrateControl

PositiveControl

TestSample

De-ionizedwater:50µL

Typsindilution:50µL

Protease-containingsamples:50µL

Totalvolume:50µL

Totalvolume:50µL

Totalvolume:50µL

Note:Iflessthan50μLofprotease-containingbiologicalsampleisused,addddH2Otomakeatotalvolumeof50µL.

3.Runtheenzymaticreaction:

3.1    Add50µLofproteasesubstratesolution(fromStep1.1)toallthewellsintheassayplate.Mixthereagentswell.

3.2   MonitorthefluorescenceincreasewithafluorescenceplatereaderatEx/Em=490/525nm.

ForkineticreADIng:Immediatelystartmeasuringfluorescenceintensitycontinuouslyandrecorddataevery5minutesfor30minutes.

Forend-pointreading:Incubatethereactionatadesiredtemperaturefor30to60minutes,protectedfromlight.Thenmeasurethefluorescenceintensity.

 

ProtocolB:Screeningproteaseinhibitorsusingapurifiedenzyme

1.Prepareworkingsolutions:

1.1   Make1Xassaybuffer:Add5mLde-ionizedwaterinto5mLof2XAssayBuffer(ComponentC).

1.2   Makeproteasesubstratesolution:DiluteProteaseSubstrate(ComponentA)at1:20in1Xassaybuffer(fromStep1.1).Use10μL/wellofproteasesubstratesolutionfora96-wellplate.

Note:The2Xassaybuffer(ComponentC)isdesignedfordetectingtheactivityofchymotrypsin,trypsin,thermolysin,proteinaseK,proteaseXIV,andhumanleukocyteelastase.Forotherproteases,pleaserefertoAppendixIfortheappropriateassaybufferformula.

1.3   Proteasedilution:Dilutetheproteasein1Xassaybuffertoaconcentrationof500-1000nM.Eachwellwillneed10µLofproteasedilution.Prepareanappropriateamountforallthetestsamplesandextraforthepositivecontrolandvehiclecontrolwells.

 

2.Addreagentspreparedinstep1intoa96-wellmicroplateaccordingtoTable1andTable2.

 

Table1.Layoutofthesamplesina96-wellmicroplate

品牌介绍
美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收(颜色)、荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学、免疫学、细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断研发新产品，快速地丰富各个领域的产品。 1）提供反应探针和发光探针，生物素和端粒酶能够应用于标记药物小分子和生物聚合物，如蛋白、核酸以及其他碳水化合物； 2）研究并生产荧光和发光探针用于检测蛋白，核酸和活细胞； 3）不断推出新型的荧光和发光探针用于检测多种酶，特别是检测水解酶和氧化还原酶类； 4）致力于开发用于信号转导研究的试剂； 5）提供生理和神经探针，特别是钙离子指示剂和膜电位探针。
公司介绍
美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收(颜色)、荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学、免疫学、细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断
品牌分类
淋巴细胞信号传导 GPCR抗体 羰基活性生物素 细胞代谢 胺反应生物素 链霉亲和素结合物 生物素化抗IgGs 乙酰基特异性抗体 细胞骨架抗体
受体结合试验 香豆素类 经典标记染料 神经酶 cAMP-GPCR分析 糖蛋白类 荧光成像 Boc氨基酸 巯基活性生物素 淬火CPG 蛋白激酶类 解理特异性抗体 胺到羧基 细胞功能分析 pH和离子指示剂 iFluor快速测试 诊断分子 氯离子通道 潮汐染料 蛋白激酶Ab 生物素结合物 金属离子 葡萄糖转运蛋白 脂肪酸转运体 MDR研究 水解酶 磷酸特异性抗体 膜电位 经典淬火剂 胺和硫醇改性剂 一般蛋白质类 胆汁酸转运蛋白 粘附力Ab trFluor染料和试剂盒 DNA检测 β淀粉样蛋白分析 转移酵素 潮汐荧光染料和试剂盒 Fmoc氨基酸 细胞周期Ab 标记单元格 染料CPGs 细胞凋亡 菁 信号中间体Ab 荧光碳水化合物标签 酶标抗IgGs 癌症研究所 流式细胞术 肽酶和蛋白酶 报告基因酶 细胞凋亡与细胞毒性 磷酸二酯酶 活性氧种类 Cytocrhome P450酶 重要污点 染料标记试剂 染色积木 标记抗体 神经抗体 荧光抗IgGs 离子通道Ab 辣根过氧化物酶（HRP） 磷酸酶 钙GPCR测定 猝灭磷酰胺 细胞毒性 氧化还原酶 RNA检测 转录抗体 mFluor染料和试剂盒 翻译Ab 染料磷酰胺岩 iFluor染料和试剂盒 组蛋白脱乙酰酶（HDAC） 肽标记试剂 离子通道 植物蛋白 阴离子
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